海狸磁珠(BeaverBeads™)在化学发光领域的应用
可用于化学发光领域的磁珠,种类如前面第三章所列。但其中,链霉亲和素磁珠的使用最为广泛,主要是因为亲和素-生物素系统的通用型以及广泛性。亲和素-生物素系统(BAS)的主要特点如下列表。
灵敏度高 生物素容易与蛋白质和核酸类等生物大分子结合,并保持大分子物质的原有生物活性。
每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。
因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。
稳定性好 生物素与亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用,亲和常数(K)为1015mol/L,比抗原与抗体间的亲和力至少高1万倍。
二者的结合稳定性好专一性强,不受试剂浓度,pH环境,抑或蛋白变性剂等有机溶剂影响。
特异性强 亲和素与生物素间的结合具有极高的亲和力,其反应呈高度专一性。而且,BAS结合特性不会因反应试剂的高度稀释而受影响,使其在实际应用中可最大限度地降低反应试剂的非特异作用。
普适性广 生物素-结合素系统的多功能性还能提供一套统一的研究方法,适合用于不同的项目体系。
其他 通用性强,可制成多种通用性试剂(如生物素化二抗)适用于不同的反应体系。
生物素与亲和素的结合具高速、高效的特性,尽管BAS的反应层次较多,但所需的温育时间很短。
海狸链霉亲和素磁珠,是采用苏州海狸生物医学工程纳米表面技术,将重组链霉亲和素蛋白高密度定向包被到超顺磁性微球表面,排列均匀,并朝向一致。产品具有较高的生物素结合效率和较低的蛋白及DNA非特异吸附。每mg磁珠的游离生物素结合量高达800pmol以上,生物素化抗体结合量为20μg以上。
海狸链霉亲和素磁珠化学发光实验结果
在配合全自动化学发光仪进行检测时,体现出很好的稳定性,以及与进口品牌磁珠相当的灵敏性。
化学发光免疫检测**项目
Competitor D
RLU-1 RLU-2 RLU-3 AVE CV Ratio(S/0)
S0 17026 17033 17804 17288 2.6% /
S1 34203 33911 36506 34873 4.1% 2.0
S2 53255 53405 52721 53127 0.7% 1.5
S3 183657 187146 168984 179929 5.4% 3.4
S4 791664 827481 795708 804951 2.4% 4.5
S5 2058123 2204629 2248230 2170327 4.6% 2.7
S6 3777841 3635292 3651176 3688103 2.1% 1.7
BeaverBeadsTMStreptavidin
RLU-1 RLU-2 RLU-3 AVE CV Ratio(S/0)
S0 9591 9817 9777 9728 1.2% /
S1 28132 29311 26109 27851 5.8% 2.9
S2 43037 42372 44145 43185 2.1% 1.6
S3 179352 165282 181423 175352 5.0% 4.1
S4 764793 731704 776344 757614 3.1% 4.3
S5 1967593 1950715 1960135 1959481 0.4% 2.6
S6 3365758 3348558 3605662 3439993 4.2% 1.8
检测方法:双抗夹心两步法
结论
BeaverBeadsTMStreptavidin具有很好的稳定性能,CV值控制在5%以内与进口磁珠相当。
BeaverBeadsTMStreptavidin对非特异性具有良好的控制,S0明显低于进口磁珠。
BeaverBeadsTMStreptavidin的灵敏度较高,Ratio(S/0)比值控制在2.0,与进口磁珠相当。