化学发光技术是近二、三十年来发展起来的一种测定方式，其利用化学反应释放的自由能激发中间体(常用碱性磷酸酶-金刚烷胺、辣根过氧化酶-鲁米诺衍生物），使其从激发态回到基态。当中间体从激发态回到基态时会释放等能级的光子，对光子进行测定而进行定量分析。化学发光具有荧光的特异性，同时不需要激发光，避免了荧光分析中激发光杂散光的影响有很高的灵敏度，并且避免了放射分析存在环境污染和健康危害，是一种非常优秀的定量分析方法。
磁珠用于化学发光领域的方法
间接法
间接法就是包被抗原，然后用酶标记的抗抗体检测样本中抗体，基本原理见图4，适合于检测对象是自身抗体的情况。间接法的优点：相对较方便，只要变换包被抗原就可以检测不同的项目。间接法的缺点：标本中的特异性抗体会竞争性的结合抗原，使结果出现假阴性。
图4. 采用间接法进行化学发光检测基本原理
操作步骤：
a)磁性微球表面固定抗原。
b)加入样本（含目标抗体）孵育，清洗。
c)加入酶标抗抗体孵育，清洗。
d)加发光底物，检测信号。
捕获法
血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定，因此测定IgM抗体多用捕获法。基本原理如图5所示，先将所有血清IgM（包括异性IgM和非特异性IgM）固定在固相上，去除IgG后测定特异性IgM。
图5. 采用捕获法进行化学发光检测基本原理
操作步骤：
a)将抗人IgM抗体连接在固相载体上形成固相抗人IgM，洗涤。
b)加入稀释的血清标本中的IgM抗体被固相抗体捕获洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。
c)加入特异性抗原试剂：它只与固相上的特异性IgM结合洗涤。
d)加入针对特异性的酶标抗体：使之与结合在固相上的抗原反应结合洗涤。
e)加底物显色，检测信号。
固相抗原竞争法
竞争法，是指受检抗体和酶标抗体竞争性的与磁珠表面抗原结合。固相抗原竞争法基本原理如图6所示。结合于固相载体的酶标抗体与受检抗体的量呈反比。若受检样本中无抗体，酶标抗体能够顺利与抗原结合，出现强信号。若受检样本中有抗体，则竞争性的占去了酶标抗体与抗原的结合，酶标抗体的结合力减弱，信号强度减弱。
图6. 采用固相抗原竞争法进行化学发光检测基本原理
操作步骤：
a)磁珠表面固定特异性抗原。
b)加受检标本和酶标抗原的混合液孵育。
c)加发光底物，检测信号。
双抗夹心（两步法）
双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，基本原理如图7所示。
图7. 采用双抗夹心法（两步法）进行化学发光检测基本原理
操作步骤：
a)将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂。
b)加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时问，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
c)加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量成正相关。
d)加发光底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。
双抗夹心法（一步法）
在一步法测定中，应注意钩状效应（hook effect），类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成夹心复合物，所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果（如图8， 双抗夹心法及双位点一步法。缺点：假阴性）
图8. 采用双抗夹心法（一步法）进行化学发光检测基本原理
图9. 采用双抗夹心法（一步法）进行化学发光检测，当样本中抗原量较多是，容易出现假阴性。
操作步骤：
a)磁珠表面固定一抗。
b)加样本和酶标二抗孵育，清洗。
c)加发光底物，检测信号。